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產品詳情

hbzy-1細胞

  • 產品名稱:hbzy-1細胞
  • 產品型號:hbzy-1
  • 產品廠商:乾思中心
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簡單介紹
hbzy-1細胞

hbzy-1細胞

的詳細介紹

 大鼠腎小球系膜細胞

(HBZY-1)
細胞介紹
大鼠腎小球系膜細胞,貼壁生長,常用于腎病發生機理的臨床研究,也可用干構
建動物摸型。
細胞特性
1)來源:大鼠腎
2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,
可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦
使用的培養基后轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養,傳代達到細胞生長
狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。
細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO,貨號11965-092),90%;北美胎牛血清
(United States,GIBCO,貨號 16000-044),10%。
2.培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
1.復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加
入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補
加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將
細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。**天換液并檢
查細胞密度。
2.細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37°C培
養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部
分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止
消化。
按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分
鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養液后吹勻。
將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者
3.細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例;
 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入lml胰酶,細
胞變圓脫落后,加入2ml完全培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
lOOOrpm離心4min去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至*終濃度為
10%。加入DMSO后迅速混勻,按每lml的數量分配到凍存管中,注意凍存
管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液
氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立
即與我們聯系。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注
意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
瓶中。
 
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