產(chǎn)品詳情
coc1細(xì)胞
- 產(chǎn)品名稱:coc1細(xì)胞
- 產(chǎn)品型號:coc1
- 產(chǎn)品廠商:乾思中心
- 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹
coc1細(xì)胞
coc1細(xì)胞
的詳細(xì)介紹人卵巢癌細(xì)胞胞 (CoCl)
細(xì)胞介紹
CoCl細(xì)胞建系于1993年(熊世鋼等)。細(xì)胞于原代培養(yǎng)至第17天**傳代,以 后反復(fù)傳代,生物學(xué)特性穩(wěn)定??杀磉_(dá)多種腫瘤標(biāo)志物和野生型P53蛋白、突變 型P53蛋白。裸鼠接種產(chǎn)生分化差的腺癌。
細(xì)胞特性
1)來源:卵巢癌
2)形態(tài):圓形或橢圓形,懸浮生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備 RPIVM-1640 培養(yǎng)基(RPIVM-1640:GIBCO,貨號 31800022,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八,丙酮酸鈉O.llg八),90%;上等胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱 濕度為70%-80%。
3. 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加 入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并檢 查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加l-2mL 培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的 新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)
胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng) 將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸 走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO 后進(jìn)行凍存。
注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立 即與我們聯(lián)系。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內(nèi)操作,并請注 意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
運(yùn)輸和保存:可選擇干冰運(yùn)輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細(xì)胞方式:(1)干冰運(yùn)輸,收到后 立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇;(2)存活細(xì)胞,收到后應(yīng)繼續(xù)生長,傳代達(dá)到細(xì) 胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。