產(chǎn)品詳情
hep g2細胞
- 產(chǎn)品名稱：hep g2細胞
- 產(chǎn)品型號：hep g2
- 產(chǎn)品廠商：乾思中心
- 產(chǎn)品文檔：
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簡單介紹
hep g2細胞
hep g2細胞
的詳細介紹人肝癌細胞
(Hep G2)
細胞介紹
該細胞系來自15歲男性白人的組織。形態(tài)為上皮形，模式染色體數(shù)為55,在免 疫抑制小鼠中不致瘤。
細胞特性
1)來源：肝細胞癌
2)形態(tài)：上皮細胞樣
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
細胞培養(yǎng)步驟
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1.準備MEM培養(yǎng)基(MEM，GIBCO，貨號41500034，添加NaHC031.5g八，丙酮 酸鈉O.llg八)，90%;上等胎牛血清，10%。
2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱 濕度為70%-80%。
3. 凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細胞處理：
復(fù)蘇細胞：將含有l(wèi)mL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加 入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補 加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。**天換液并檢 查細胞密度。
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培
養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部 分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止 消化。
按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分 鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者 瓶中。
細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄 去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養(yǎng)基后 加入凍存管中，再添加1〇%DMSO后進行凍存。
注意事項：
收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立 即與我們聯(lián)系。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內(nèi)操作，并請注 意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
運輸和保存：可選擇干冰運輸及發(fā)送復(fù)蘇存活細胞方式：（1)干冰運輸，收到后 立即轉(zhuǎn)入液氮凍存或直接復(fù)蘇；（2)存活細胞，收到后應(yīng)繼續(xù)生長，傳代達到細 胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。
細胞用途：僅供科研使用。