產品詳情
dt40細胞
- 產品名稱：dt40細胞
- 產品型號：dt40
- 產品廠商：乾思中心
- 產品文檔：
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簡單介紹
dt40細胞
dt40細胞
的詳細介紹雞淋巴瘤細胞
(DT40)
細胞介紹
DT40是來自HylineSC雞法氏囊淋巴細胞株經鳥類白血病病毒誘導建株的。原始
淋巴瘤用羅氏相關病毒l(RAV-l)感染出生1天的小雞得到。法氏囊中生成的腫瘤
制成細胞懸液后通過靜脈注射輸入同基因型的受體小雞。經過一次體內移植后，
建立了 DT40細胞株。這株細胞包含的前病毒基因整合在c-myc原癌基因的上游，
表達的c-myc RNA水平較高。它缺少一個正常c-myc基因，但含有兩個拷貝ALV
去調控的myc基因。這株細胞保留了重排免疫球蛋白輕鏈基因(IgL)的能力。在
IgL位點，DT40包含一個重排和一個胚系同源基因。c-rel基因和v-rel癌基因在
DT40細胞株中都能誘導組織相容性(MHC)II類抗原表達。v-rel誘導的MHCII表達
比c-rel誘導快，且其有效性在數周后達到c-rel的50倍。這株細胞呈淋巴母細胞
表型。傳染性檢測表明DT40釋放低水平的傳染性RAV-1。這株細胞可以用于穩
轉研究。
細胞特性
1)來源：雞淋巴瘤
2)形態：淋巴母細胞
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存：使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后，
可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦
使用的培養基后轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養，傳代達到細胞生長
狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途：僅供科研使用。
細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備：
1. 準備 DMEM 培養基(DMEM，GIBCO,貨號 11965-092)，85%;胎牛血清，10%，
雞血清，5%。
2. 培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱
濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%完全培養基，10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理：
復蘇細胞：將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加
入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補
加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將
細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。**天換液并檢
查細胞密度。
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL
培養液后吹勻，將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的
新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細
胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時，應
將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸
走)，加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO
后進行凍存。
注意事項：
收到細胞后，若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立
即與我們聯系。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內操作，并請注
意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。