產品詳情
nci-h446細胞
- 產品名稱：nci-h446細胞
- 產品型號：nci-h446
- 產品廠商：乾思中心
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簡單介紹
nci-h446細胞
nci-h446細胞
的詳細介紹
人小細胞肺癌細胞(NCI-H446)
細胞介紹
NCI-H446細胞株從一位小細胞肺癌患者的胸水中建立。細胞的原始形態并不具
有小細胞肺癌特征。這個細胞株是小細胞肺癌的生化和形態學上的變種，表達神
經元特有的烯醇酶和腦部肌酸激酶同功酶。zuo旋多巴脫羧酶、蠶素、抗**激素、
催產素或胃泌激素釋放肽未達到可檢測水平。C-myc DNA序列擴增約20倍，c-myc
RNA比正常細胞增加15倍。*初傳代培養基用添加10 nM氫化可的松,0.005
mg/ml胰島素,0.01 mg/ml鐵傳遞蛋白，10 nM 17-beta-雌二醇,30 nM亞硒酸鈉
的 RPMI 1640, 95%，胎牛血清,5%。
細胞特性
1)來源：肺；轉移灶：肋膜滲出癌；小細胞肺癌
2)形態：上皮細胞樣
3)含量：>lxl06 個/mL
4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存：使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后，
可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦
使用的培養基后轉移至l〇cm培養皿或者T25培養瓶中培養，傳代達到細胞生長
狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途：僅供科研使用。
細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備：
1.準備 RPIVM-1640 培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號 21875-091)，90%;北美胎牛
血清(United States，GIBCO，貨號 16000-044)，10%。
2. 培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱
濕度為70%-80%。
3.凍存液：90%完全培養基，10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理：
復蘇細胞：將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加
入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補
加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將
細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。**天換液并檢
查細胞密度。
人小細胞肺癌細胞
(NCI-H446)
細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中，置于37°C培
養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部
分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止
消化。
按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分
鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養液后吹勻。
將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄
去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約lml含血清的培養基后
加入凍存管中，再添加1〇%DMSO后進行凍存。
注意事項：
收到細胞后，若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立
即與我們聯系。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內操作，并請注
意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。