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產品詳情

lncap細胞

  • 產品名稱:lncap細胞
  • 產品型號:lncap
  • 產品廠商:乾思中心
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簡單介紹
lncap細胞

lncap細胞

的詳細介紹

 人前列腺癌細胞 (LNCaP)

細胞介紹
人前列腺癌細胞LNCaP克隆FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴 結針刺活檢中分離,該患者經確診為前列腺癌轉移。這株細胞對5-ct-二氫睪酮(生 長調節子和酸性磷酸脂酶產物)有響應。這株細胞并不形成一致的單層,而是形 成集落,在傳代時可以用滴管反復吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不 形成匯合,很快使培養基變酸。生長很慢,傳代后48小時內不應擾動。當培養 瓶封包后,多數細胞從培養瓶底分離,懸浮在培養基中。收到后,在通常培養單 層細胞的條件下培養24到48小時,以使細胞再貼壁。此后可以換上新鮮培養液。 如果需要,培養瓶內容物可以收集,300g離心15分鐘,以10毫升培養液重懸 并培養到一個單獨的培養瓶中。請使用Coming的Cellbind培養瓶培養。
細胞特性
1)來源:前列腺;左鎖骨淋巴結癌轉移灶
2)形態:上皮細胞樣
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
運輸和保存:可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式:(1)干冰運輸,收到后 立即轉入液氮凍存或直接復蘇;(2)存活細胞,收到后應繼續生長,傳代達到細 胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
細胞用途:僅供科研使用。
 
細胞培養步驟
1)培養基及培養凍存條件準備:
1.準備 RPIVM-1640 培養基(RPIVM-1640:GIBCO,貨號 31800022,添加 NaHC03 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g八,丙酮酸鈉O.llg八),90%;上等胎牛血清,10%。
2. 培養條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37攝氏度,培養箱 濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
2)細胞處理:
復蘇細胞:將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍,加 入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補 加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將 細胞懸液加入l〇cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。**天換液并檢 查細胞密度。
細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
力口 2m丨消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中,置于37°C培
養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部 分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止 消化。
按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分 鐘,棄去上清液,補加l-2mL培養液后吹勻。
 將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者 瓶中。
細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄 去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約lml含血清的培養基后 加入凍存管中,再添加1〇%DMSO后進行凍存。
 
注意事項:
收到細胞后,若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立 即與我們聯系。
所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注 意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
 
 
 
 
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