人胚肺細胞 (MRC-5)

細胞介紹

MRC-5細胞系來自14周齡男性胎兒的正常肺組織，該細胞老化前能傳代42到 46次群體倍增。它是正常二倍體細胞系，46, XY核型。模式染色體數為46,概 率為70%。

細胞特性

1)來源：肺

2)形態：成纖維細胞

3)含量：>lxl06 個/mL

4)污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5)規格：T25瓶或者lmL凍存管包裝

運輸和保存：可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：（1)干冰運輸，收到后 立即轉入液氮凍存或直接復蘇；（2)存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細 胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。

細胞用途：僅供科研使用。

細胞培養步驟

1)培養基及培養凍存條件準備：

1.準備 MEM 培養基(MEM:GIBCO,貨號 11095-080)，北美胎牛血清(United States， GIBCO，貨號 16000-044)，15%，1% PS。

2. 培養條件：氣相：空氣，95%;二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱 濕度為70%-80%。

3.凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。

2)細胞處理：

復蘇細胞：將含有lmL細胞懸液的凍存管在37°C水浴中迅速搖晃解凍，加 入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補 加l-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將 細胞懸液加入l〇cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。**天換液并檢 查細胞密度。

細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

力口 2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養瓶中，置于37°C培

養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部 分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分 鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養液后吹勻。

 將細胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者 瓶中。

細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，先 要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行， *后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心，用血清重懸浮，加DMSO 至*終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每lml的數量分配到凍存管 中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。

收到細胞后，若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立 即與我們聯系。

所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物**臺內操作，并請注 意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

注意事項:

收到細胞后，若發現干冰己揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立 即與我們聯系。

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