產(chǎn)品詳情
ramos細(xì)胞
- 產(chǎn)品名稱:ramos細(xì)胞
- 產(chǎn)品型號:ramos
- 產(chǎn)品廠商:乾思中心
- 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹
ramos細(xì)胞
ramos細(xì)胞
的詳細(xì)介紹人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞
(RAMOS)
細(xì)胞介紹
該細(xì)胞來源于一位3歲的白人Burkitt淋巴瘤患者;EBV陰性;表達(dá)IL-4受體和低 親和性IgE受體(CD23);分泌IgM (lamda L);表達(dá)膜型和分泌型的免疫球蛋白。
細(xì)胞特性
1)來源:血液
2)形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣,懸浮生長
3)含量:>lxl06 個/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
細(xì)胞接受后的處理:
1.收到細(xì)胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
2.請先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約 2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
4. 如果細(xì)胞長滿(90%以上)請及時進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附 帶的完全培養(yǎng)基。
5.接到細(xì)胞次日,請檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我 們?nèi)〉寐?lián)系。
細(xì)胞用途:僅供科研使用。
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
準(zhǔn)備 RPIVM-1640 培養(yǎng)基(RPMI-1640,GIBCO,貨號 11875085),90%;胎牛
血清,10%。
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養(yǎng)箱濕度 為 70%-80%。
凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低 于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心 管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培 養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。
**天換液并檢查細(xì)胞密度。
細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 l-2mL培養(yǎng)液后吹句,將細(xì)胞懸液按1: 2到1: 5的比例分到新的含8ml培 養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì) 胞懸液按1: 2到1: 3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時,應(yīng) 將細(xì)胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細(xì) 胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管 中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
注意事項:
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染, 請立即與我們聯(lián)系。
所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內(nèi)操作, 并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。